距离那场大战,已经过去了十年之久了。
即便是如今,我再想起当时的情况,都是感觉得不可思议,不敢相信,也难以置信的!原来一个人的高度能够达到如此的高。
当时的结果……算了,想这么多干什么?
杨光摇了摇自己的头,强迫自己不要去想十年前发生的那些事情。
我当时是怎么想的?为了钱答应了外面的力量来调查中医院?为了钱来对付钟医!哈哈哈哈,我真的有点自不量力了。
杨光一边嘲笑自己,一边有无奈的想道。
唉,最后还不是这样,自己竟然还被钟医说动了,加入了他们。帮助了钟医,加入了中医院的科研室。
到最后,杨光都不得不嘲笑自己一句:真的是打不过敌人,那就加入他们。
杨光虽然一边陷入了回忆,一边在自嘲自己,但是他手上的工作却没有停下,大脑疯狂的运转着。
“要不是上了钟医的贼船,我怎么会在这里?”
“我在这里,那个杂毛却跑了!”
“把这些难缠的工作交给我,他也不怕良心不安!”
杨光手上的动作没有停下,嘴上却碎碎念。
这一次,他是在帮钟医完成乌骨藤中五环三萜类化合物的分离鉴定。
这也是十年前那一场大战留下来的疑问。
乌骨藤为萝蘼科牛奶菜属植物通关藤的干燥藤茎,始载于《颠南本草》。
主产于云南、贵州地区,具有清热解毒,止咳平喘、散结止痛等功效。
十年前,钟医已经证实具有调节免疫功能、抗肿瘤等作用。
目前临床上作为治疗肿瘤一线药物用于治疗胃癌、肝癌、宫颈癌等。
现在,杨光是在利用硅胶柱色谱法、凝胶柱色谱法及半制备高效液相色谱法,从乌骨藤正丁醇萃取物中分离得到4种五环三萜类单体化合物。
他判断,乌骨藤化学成分研究多集中在甾体皂苷和多糖类成分,五环三萜类化学成分研究报道少见。
所以这一次,杨光利用核磁共振谱、质谱、红外光谱等分析方法鉴定了4种化合物,即:口-香树脂醇(I)、白桦酯醇(Ⅱ)、白桦酯酸、羽扇豆醇。
它们为首次在中药乌骨藤和牛奶菜属植物中发现,其中后3种化合物具有抗肿瘤活性。
杨光带着几个研究员,埋头在江州县中医院的实验楼中。
对,实验楼。现在的江州县中医院,已经不是当年在门诊大楼中取了一层来用的地方了,现在已经有了自己单独的实验楼了。
所有的设备也鸟枪换炮了。
摆在杨光面前的,有YANOcMP—s型的显微熔点测定仪(最先进)。
有Bmker-ARx—300型核磁共振仪(TMs内标,瑞士BnIker公司,全国独此一台)。
1100系列sL离子阱质谱仪(安捷伦公司出产的)。
Micm高分辨质谱仪(英国Micron,是钟医用医术换来的)。
BrukerIFS-55型傅立叶变换红外分光光度计。wateB半制备高效液相色谱仪。1100分析型高效液相色谱仪。薄层层析硅胶GFo、柱层析硅胶。sephad—LHi20凝胶。
这些,大部分一听到是江州县中医院要采购,很豪爽的就把东西提供给了中医院。
杨光手上摆弄着林婉岚从云南种植回来的乌骨藤,心里又忍不住一阵冷笑:好好的工作不做,跑去云南种地,还把两个小可爱带走了,气死人了。
杨光心里越想越是气,手上动作却没有停下。
他取乌骨藤干燥药材50千克,粉碎,那种狠劲,看得周围的人已经杨光在弄什么不共戴天的仇人一般。
然后,他分别用百分之70乙醇8倍、6倍量回流提取2次,每次2小时,合并2次提取液,减压浓缩至浸膏,加水溶解。
再依次用石油醚、乙酸乙酯、水孢和正丁醇萃取3次,合并正丁醇萃取液,减压回收正丁醇并浓缩得浸膏392克。
再之后,他取了正丁醇萃取后的浸膏114克,经硅胶柱层析色谱分离,依次以氯仿-甲醇溶剂系统梯度洗脱,分段接收共得到26个流分。
其中流分2再经硅胶柱层析色谱分离分别以石油醚-乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱,收集体积比为100∶6和100∶18洗脱部分。
流分4再经硅胶柱层析色谱分离,分别以氯仿-乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱。
收集体积比为100∶2和100∶15洗脱部分,其中体积比为100∶2的洗脱部分在氯仿中反复重结晶得化合物164mg。
体积比为100∶15洗脱部分再经SephadexLH-20凝胶柱色谱分离,收集氯仿-甲醇混合溶剂(1∶2)洗脱部分。
取上述3个洗脱部分,经TLC检识,成分有所交叉,故将三者合并,甲醇超声溶解,备用。
等上述做完了之后。
杨光看了一眼结果,说道:“大家谨慎一些,宁愿做慢一些,也不要因为我们想要赶进度而报废了。”
“好的。”
“好的,杨科长,没有问题。”
虽然近七八年的结果近在眼前,众人还是强迫自己冷静下来。
然后进入半制备液相色谱分离。
取了上述溶液,用0.45μm微孔滤膜滤过,注入半制备液相色谱仪。
“色谱条件为色谱柱∶PhenomenexKromasilCs(250mm×10mmi.d.,5μm)。”
“流动相∶甲醇-水98∶2,VV。”
“进样浓度∶5gL。进样量∶600μL,流速∶4mLmin。”
“柱温∶25℃。检测波长∶210nm。”
研究员们一个个把手中的仪器数据报备道。
“根据色谱峰出峰时间接受流分,分离得到化合物Ⅱ23.6mg、化合物Ⅲ30.1mg和化合物Ⅳ27.1mg,纯度96%。”
杨光看了一眼,说道。
“接下来是样品结构的测试。”
“取上述4种化合物分别进行核磁共振谱(NMR)、质谱(MS)、红外(IR)光谱的测试。”
NMR测试条件∶化合物I、Ⅱ、Ⅳ以CDCl,为溶剂,化合物Ⅲ以C,D,N为溶剂,TMS为内标。
IR测试条件为:KBr压片。
HRMS测试条件:离子源为API-ES,正离子或负离子方式检测,夫溶剂化气为N。
低分辨ESI-MS测试条件。离子源为ESI,正离子和负离子方式检测,去溶剂化气为He。
“争取在今天我们就要有一个结果,不论多晚!”杨光大声地吼道。
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